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论文解读--贝莱斯芽孢杆菌K2对杂交石斑鱼生长、免疫和抵抗哈维氏弧菌感染的影响

出处:公众号水生动物健康评估 作者:陆枝 祥仔视觉祥仔视觉手机在线视频网 2019-11-06 11:06:00

今天与大家分享一篇来自Fish and Shellfish Immunology的文章:贝莱斯芽孢杆菌K2对杂交石斑鱼生长、免疫和抵抗哈维氏弧菌感染的影响。文章引用信息如下:
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细菌性疾病的爆发导致祥仔视觉祥仔视觉手机在线视频人员和企业蒙受巨大的经济损失,现已成为鱼类祥仔视觉手机在线视频的主要威胁。在过去几十年里,抗生素和消毒剂使用是控制鱼类细菌性疾病的主要手段。然而,抗生素滥用及残留对人类健康造成了严重的威胁,急需替代产品来控制鱼类细菌性疾病。

近来,益生菌喂养被认为是一种很有前景的控制鱼类疾病的策略,它主要通过酶促进消化、抑制病原微生物、促进生长因子和增强宿主免疫来促进宿主健康。一些研究表明,从鱼的肠道分离出的益生菌具有抑制病原体生长的能力。

本研究从健康石斑鱼肠道中分离到一株芽孢杆菌K2,并通过基因序列比对和系统分析,确定该菌株为Bacillus velezensis。体外抗菌试验表明,该菌株对几种鱼类致病菌具有明显的抗菌活性。此外,本研究评价了B. velezensis K2作为饲料益生菌对杂交石斑鱼生长、免疫力和抗病性的潜在作用。

菌株分离及抗菌实验
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抗菌试验发现有7株菌株对哈维氏弧菌有拮抗作用,其中一株菌株被命名为K2,表现出最强的抗菌活性。

安全评估
  溶血实验发现K2不具溶血活性,以不同剂量注射到鱼体体内也未造成鱼体死亡。
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生长性能

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对照组(基础日粮)和试验组(添加1×107CFU/g K2菌株)投喂石斑鱼。每周测定体长、体重和胴体重。结果表明在体长、体重和胴体重方面2组均无显著差异。

血清酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和C3活性

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饲料中添加K2菌株的鱼的ACP活性在第一周显著高于对照组(P<0.05图5A)。在第二周极显著高于对照组(P<0.01图5A)。饲喂7、14、21和28天后,碱性磷酸酶(Fig. 5B)和 C3 (Fig. 5C)活性没有表现出显著差异。

添加B. velezensis K2后免疫相关基因的表达

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采用实时定量PCR方法检测IL-8(A)、TLR-5(B)、CC趋化因子1(C)、溶菌酶(D)、piscidin(E)、IgM(F)、MyD88(G)和TLR-3(H)的相对表达,结果表明:
饲喂第一周后,IL-8水平显著升高(P<0.05,图6A),而第二周和第四周显著性下降(P<0.01)。
CC趋化因子1基因的表达在第14天出现了极低的表达(P<0.01,图6c),IL-8和CC趋化因子1的表达都受到抑制(P<0.01),在第14天和第28天下调,特别是在第28天和第14天有显著差异(分别为P<0.05和0.01,图6A、C)。
在摄食28天时,用B. velezensis K2处理的鱼与对照鱼TLR5(图6B)mRNA表达呈下降趋势。
溶菌酶基因的表达呈上升趋势。喂养1~3周,喂养1周和2周后 lysozyme差异显著(P<0.05,图6d)。
piscidin、IgM和MyD88 mRNA的表达也是相同的。在第四周时瞬时下调,包括piscidin、IgM和MyD 88基因的显著改变(P<0.05,图6e,F,G)。相反,TLR 3在益生菌处理的鱼类中的mRNA表达下调。摄食28天与对照组比较,差异有显着性意义(P<0.05,图6h),第28天显著降低(P<0.05,P<0.05)。

抗感染分析

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本研究通过连续1周的时间记录鱼类感染哈维氏弧菌死亡情况,评价芽孢杆菌K2对石斑鱼的保护作用。如图7所示。石斑鱼饲喂常规饲料和含有芽孢杆菌K2的饲料,存活率分别为25%和55%,统计分析显示菌株K2显著提高了鱼的生存率。

总之,本研究确定了(B.velezensis)作为一种潜在的益生菌在祥仔视觉祥仔视觉手机在线视频中的应用效果。证明用含1×107 cfu/g K2的饲料喂养石斑鱼,处理28d可提高石斑鱼对哈维氏弧菌的抗性,但对其生长性能无明显改善。K2可诱导某些先天细胞免疫和体液免疫基因的上调,从而增强对哈维氏弧菌的抵抗力。
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